相差显微镜利用细胞成分内部以及未染色细胞与其周围水介质之间的微小折射率差异来在这些和类似的透明样本中产生对比度。物镜相位板配置的进展已导致了一种新技术,即变迹相差技术,该技术可以非常清晰和清晰地观察和拍摄具有大相差的相对象的结构。
本程序将使用出现在“标本图像”窗口中的,用相差显微镜捕获的随机选择的数字图像进行初始化。视口下方是一个标记为“选择标本”的下拉菜单,可用于从调色板中选择新标本。视口的右边出现一对相位板,它们位于不同的视角,并且相位差膜被中性密度滤光片包围,默认透射值为25%。该变迹相环中性密度滑块控制中性密度变迹相环的膜密度(和透射率值)。向右移动滑块可将切趾相环中性密度增加到50%,而将滑块向左平移则将密度减小到最小(零密度或透明;透射率等于100%)。当左右移动滑块时,“标本图像”窗口中的图像会发生变化,以反映切趾相板中性密度对标本外观的影响。
相差显微镜中不幸的伪像是光晕效应,这会导致相位对象周围出现虚假的明亮区域或图像中的反差。这种效应在引起大相移的样品中尤为普遍。减少光晕伪影曾经被认为是一个困难的理论问题,但可以通过利用位于后焦平面内物镜中的相板中与相膜相邻的选择性幅度滤波器来实现。这些幅度滤波器由应用于相膜周围相板上的中性密度薄膜组成。经典相板中相移环的透射率约为25%,而切趾板中相移环周围的两个相邻环的中性密度为50%。两块板中相膜的宽度相同。这些值与相差显微镜中应用于标准板的相移薄膜的透射率值一致。尼康生产几种切趾相差物镜。