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显微镜物镜通常设计成具有较短的自由工作距离，自由工作距离定义为当样品聚焦时从物镜的前透镜到盖玻片最近表面的距离。如果物镜设计为无盖玻片，则工作距离由物镜前透镜到样品表面的线性测量确定。
示于图1是一种物镜的示意图示出了齐焦和工作距离长度规格，以及其他描述刻或印刷在物镜桶。一般来说，物镜工作距离随着所述倍率以及数值孔径都增加，如在呈现表1为一个高度校正系列尼康的俯视萤石和打算复消色差的物镜。当前的趋势是生产具有尽可能长的工作距离的干物镜，但由于对具有更高分辨力的高数值孔径的需求，需求受到了一定程度的限制。这通常导致制造商在这两个参数之间折衷。
在前透镜元件和盖玻片之间以定义的折射率的液体介质工作的浸没物镜的工作距离长度受到更多限制。如果工作距离太大，则在物镜前透镜和样品之间保持浸没液汇合网络可能会成为问题，从而导致像差的引入和随后图像的劣化。具有极近工作距离的物镜是弹簧加载的，因此与盖玻片接触时，整个前透镜组件将缩回。这些安装座通常被称为回缩限位器，可确保对样品或物镜前透镜的意外损坏提供足够的保护。
现代尼康CFI60物镜中可用的工作距离的范围。
对于许多应用，非常需要长的自由工作距离（并且经常是必需的），并且为实现这种用途而设计了专门的物镜，尽管很难实现大的数值孔径并需要对光学像差进行必要的校正。长工作距离物镜在通过厚厚的玻璃墙体外检查标本以及化学和冶金显微镜时特别有用，在这种情况下，必须用厚的盖玻片保护物镜前透镜免受热，苛性蒸汽和挥发性化学物质等环境危害。这些物镜的工作距离通常超过具有相同或稍大数值孔径的可比物镜的工作距离的两到三倍。表2列出了具有超长工作距离（ELWD）和超长工作距离（SLWD）的无限校正尼康物镜。请注意，工作距离随倍率和数值孔径的增加而减小，但不如表1中列出的物镜那么大。还要注意，SLWD物镜比ELWD系列物镜具有更长的工作距离，但数值孔径相应更低。
借助现代制造技术，已经可以大幅度提高显微镜物镜的机械精度，包括定心和齐焦距离，样品平面与将物镜支撑在旋转物镜上的法兰的肩部之间的距离（请参见）。图1）。因此，在现代研究级显微镜上，当一个人旋转旋转的物镜并从一个物镜切换到另一个物镜时，标本可以非常紧密地聚焦（在一个微米左右），并且可以集中在视场的中心。
多年以来，大多数制造商为生物应用而设计的物镜都符合国际公认的惯例，齐焦距为45.0mm，英国皇家显微镜学会（RMS）标准定义了在物镜架中支撑物镜的螺纹的尺寸，机械管长度为160mm。因此，来自不同制造商的物镜似乎是可以互换的。但是，随着无限远校正物镜的推出，来自不同制造商的物镜之间的便利互换性再次消失了。
最近，尼康CFI60光学系统的推出，具有“无铬”物镜，套筒镜和目镜，使该公司能够单独校正每个组件，而无需使用一个组件对另一个组件进行校正。该系统还引入了60mm的齐焦长度和25mm的螺纹直径，以替代RMS螺纹尺寸。
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