反射光显微镜通常被称为入射光,落射照明,或金相显微镜,是荧光的选择的方法和用于成像该保持不透明,即使研磨到厚度为30微米的样品。
标本落入该类别的范围是巨大的,并且包括大多数金属,矿石,陶瓷,许多聚合物,半导体(未处理硅,晶片和集成电路),炉渣,煤,塑料,涂料,纸,木材,皮革,玻璃夹杂和多种专门材料。 因为光不能穿过这些标本,它必须被引向所述表面,并最终由任一镜面或漫反射返回到显微镜物镜。 如上所述,这样的照明是最经常被称为落射照明,或垂直照明(从上方基本上始发),与此相反落射(发射)的照明,通过检体传递。
今天,许多显微镜制造商提供的模型,允许用户交替或同时使用垂直和透射照明进行调查。 构造成用于这两种类型的照明的典型显微图1示出了用于反射光的光路与源自对反射光(上部壳体在图1和图3)的灯壳体照明射线开始。 该光下穿过聚光透镜并进入其中,它是由光圈和视场光阑控制的垂直照明器(图2)。 穿过垂直照明后,将光然后通过物镜分束器(半反射镜或椭圆形的第一面反射镜)反射以照射样品。
光从样品表面反射的重新进入物镜,并传递到双目头部在那里被引导要么目镜或为显微摄影的端口。 反射光显微镜常常是工业显微镜的领域,尤其是在快速增长的半导体领域,因此代表显微镜研究的最重要的环节。
一个典型的直立复式反射光显微镜还装有用于透射光具有两个目镜观看管(图1)和通常是一个三目管头,用于安装一个常规的或数字/摄像机系统(未示出)。 标准装备目镜通常是放大10倍,而且大部分显微镜都配有可容纳四到六个物镜的物镜转盘。 机械载物台与样品保持器可在X和Y方向被移动和整个载物台单元能够精确上下用粗运动和精细调焦机构的控制。
内置光源的范围从20至100瓦钨 - 卤素灯泡于在荧光显微镜中使用较高的能量汞蒸气或氙气灯。 光从通过管口以上但低于观看管头的下侧插入一垂直照明灯箱通行证。 检体的顶表面是直立(通常没有盖玻片)在面向物镜,这已被旋转到显微镜的光轴的载物台。 垂直照明水平取向成90度角的显微镜并平行于台面的光轴,与连接到照明器的背面的灯外壳。 粗,微调旋钮提高或降低在或大或小的增量载物台,将标本清晰聚焦。
反射光显微镜的另一个变化是反向的勒夏忒列设计显微镜-的(图4)。 在倒置的立场,将样品放置在台上朝向其感兴趣的表面向下。 这种设计的主要优势是,样品可以当它们太大而无法进入一个直立式显微镜的范围可以很容易地检查。 此外,只有朝向物镜侧不必是完全平坦的。 其物镜是使他们面临的镜头正面向上朝着标本和聚焦要么是通过移动物镜转换器或整个载物台上下完成了台下安装在物镜转换器。
倒置显微镜直立在显微镜的主体内掺入的垂直照明器。 许多类型的物镜可以与倒置的反射光显微镜中使用,并且反射的光照明的所有模式是可能的:明,暗场,偏振光,微分干涉对比,和荧光。 许多倒置显微镜都有内置的35毫米至/或大画幅相机或者是模块化的,允许这样的配件进行连接。 一些仪器包括用于图像,对比度滤镜在放大倍率转换,并有多种光罩的。 因为在倒置显微镜是用于金相喜爱仪器,它经常被称为金相。 制造商在很大程度上迁移到在反射光显微镜使用无限远校正光学系统,但仍然有成千上万的固定管长度的显微镜中使用具有160和210毫米之间的管长度校正物镜。
在垂直照明器,光从光源,通常为12伏50或100瓦钨卤素灯行进,穿过收集器的透镜,通过可变孔径光圈开口和通过可变和定心预聚焦场光圈的开口隔膜。 然后,光撞击部分镀银平面玻璃反射器,或撞击椭圆开口,用于暗场照明(图5)的反射镜的一个完全镀银周边。 平面玻璃反射器部分镀银上面向光源和抗反射涂覆在面向观察筒在明反射照明玻璃侧玻璃侧。 光从而向下偏转到物镜。 反射镜以45度的光沿垂直照明行进的路径的角度倾斜。
光到达样品,其可以吸收一些光并反射一些光,无论是在一个镜面或漫反射的方式。 被返回向上可以通过根据物镜的数值孔径的物镜被捕获,然后光通过部分镀银反射镜(或在暗视野,通过椭圆孔)。 在无限远校正物镜的情况下,光从物镜,在平行(从每个方位)线投射样品到无穷的图像。 平行光线进入管透镜,其在所述目镜的固定光阑开口(中间图像平面)的平面形成的样品的图像。 要注意的是很重要的,在这些反射光的系统中,物镜具有双重功能:在向下作为正确对准的匹配良好校正的聚光镜的方法; 的方式向上作为突出朝向目镜的图像承载光的物镜的习惯性作用的成象物镜。 当仪器调节,以产生科勒照明最佳性能的反射光照明实现。 (除了提供分散均匀照明)柯勒照明的功能是确保该物镜将能提供优良的分辨率和即使光的源是线圈灯丝灯良好的对比度。
一些现代的反射光照明被描述为普遍照明因为,与几个额外的配件和很少或没有拆解,显微镜可以容易地从反射光显微术的一个模式切换到另一个。 通常,反射镜可以从光路共以便允许透射光观察中移除。 这样的通用发光器可以包括部分反射平面玻璃表面(半反射镜),用于明,并与用于暗场观察用椭圆形的,位于中央的清晰开口完全镀银反射面。 的最佳设计的垂直照明包括集电极透镜来收集和控制光,孔径光圈和预聚焦,定心场光阑,以允许期望的科勒照明。
垂直照明器(图2)也应作出规定的过滤器对比度和显微摄影,偏光片,分析片,并补偿板的偏振光和微分干涉对比照明的插入。 在设计用于无限远校正物镜垂直照明,照明器还可以包括一个管透镜。 固定到垂直照明的后端是一个灯箱(图3),它通常包含钨卤素灯。 对于荧光工作,灯箱能与含有汞的燃烧器的嵌合来代替。该灯可以通过内置在显微镜电子支架,或者在荧光,由外部变压器或供电的装置进行供电。
在反射光显微术,吸收和通过样品中的入射光线的衍射常常导致通过灰度,或彩色的各种色调的图像中容易辨别变型中,从黑色如果样品着色。 这样的标本被称为振幅标本和可以不需要特殊的对比度的方法或处理,以使它们的细节可见。 其他标本显示,强度和/或颜色,这样差别不大,他们的功能细节是非常难以辨别,分清在明反射光显微镜。 这样的样本的行为类似于载物台标本在透射光下的工作如此熟悉,而且适合于暗场和反射光微分干涉对比应用。