台下聚光镜从显微镜光源收集光并将其集中到光锥照亮具有均匀强度在整个视场标本。至关重要的是,聚光光锥适当调整,以优化的光的强度和角度进入物镜的前透镜。每一个物镜被改变时,一个相应的调整必须在台下聚光器被执行以用于新物镜的数值孔径提供合适的光锥。
一个简单的双透镜阿贝聚光在图1中示出。在该图中,从显微镜照明源的光通过聚光孔径光阑 ,位于所述聚光镜的底部,并通过内部透镜元件,其然后项目光集中通过在从每一个方位平行束中的标本。大小和光锥的数值孔径由该孔径光阑调整来确定。通过试样传递(在显微镜载玻片)之后,将光发散到具有适当角度的倒圆锥填补物镜的前透镜。
光圈调整和适当的聚焦聚光镜是至关重要在实现物镜的全部潜力。具体地,适当地使用可调节孔径光圈的(并入聚光镜或略低于它)是在确保正确照度,对比度和景深最重要的。这种可变光阑的开闭控制照明光线(并因此孔),其通过聚光镜,通过试样,然后进入物镜的角度。聚光镜高度由齿条和小齿轮系统,它允许聚光镜焦点被调整为检体的适当的照明控制。以相对于照明和焦点锥体聚光镜的正确定位是定量显微镜和最佳显微摄影的关键。
必须小心,以保证聚光镜光圈打开到正确的位置相对于物镜的数值孔径。当聚光镜孔径光圈被打开太宽,通过从试样斜光线折射产生的杂散光可引起眩光,并降低整体对比度。另一方面,当孔径太小时,照明锥体不足以提供足够的分辨率和图像失真由于从试样的折射和衍射。
根据它们的光学校正的程度:(明,暗场,相衬等例),并且也聚光镜被分为物镜的分类。有四个原则类型的聚光镜相对于光学像差的矫正,如表1所列
电容式 | 像差修正 | |
---|---|---|
球形 | 色 | |
阿贝 | --- | --- |
X | --- | |
消色 | --- | X |
ic- 消色 | X | X |
最简单和最纠正(也是最便宜的)聚光镜是阿贝聚光镜,可以在高端机型有一个数值孔径可达1.4有三个或多个内部镜头元件。虽然阿贝聚光镜是能够通过明亮的光线,它不纠正或者色差或球形光学像差。一个典型的阿贝聚光在图2中所示在其最简单的形式中,阿贝聚光镜具有产生照明场光阑不是尖锐并且由蓝色和红色的边缘包围的图像的两个光学透镜元件。
如没有光学校正的结果,阿贝聚光镜主要适合与适度的数值孔径和倍率的物镜例行观察。阿贝聚光镜的主要优点是照明,该聚光镜是能够产生以及其与长工作距离的物镜工作能力的宽锥。大多数显微镜制造商与阿贝聚光作为默认提供,这些电容器是常规实验室使用真正的工作母机。
聚光镜修正的下一级被完全校正球面两种(消球差)或色(无色)光学像差等光程和消色差聚光镜之间的分裂。这些聚光镜的典型实例在图中示出3(消色差)和图4(消球差)。消色差聚光镜通常包含三至四个透镜元件和在两个波长(红色和蓝色),色差校正。
在图3所示的无彩色的聚光包含四个透镜元件和具有0.95的数值孔径,而无需浸油能达到的最高。该聚光镜与“干”的物镜常规和关键的实验室分析,也为黑白或彩色摄影非常有用。
在选择台下聚光镜的一个关键因素是数值孔径性能,这将是必要的,以提供照明锥体适当的物镜。聚光镜数值孔径应等于或大于最高物镜的数值孔径的略少。因此,如果最高放大倍数的物镜是油镜物镜具有1.40的数值孔径,则台下聚光器还应有一个等效的数值孔径,以保持最高的系统的分辨率。在此情况下,浸油将具有聚光镜顶部透镜和显微镜载玻片,以实现预定的数值孔径(1.40)和分辨率的下侧之间加以应用未能利用油将在系统的最高数值孔径限制为1.0,与空气作为所述成像介质的最高可获得的。
消球差聚光镜被良好地校正球面像差(绿色波长),但不为色差。为1.40的数值孔径的典型消球差聚光镜在图4中示出该聚光镜设有五个透镜元件,并且能够聚焦光在一个单一的平面。消球差聚光镜能够通过任何一个激光源或使用钨卤素照明干涉滤光片产生绿光使用时产生极好的黑色和白色的显微照片。
校正光学像差的最高水平等光程,消色差聚光镜中。 此聚光镜很好地校正为色差和球面像差和是选择用于在临界颜色显微摄影用途,用白色光的聚光器。 典型的消球差-消色差聚光镜如图5所示(数值孔径= 1.35)。该聚光镜特点凝成两个双峰和四个单镜头八个内部镜头元件。
聚光镜壳体上找到雕版包括其类型(消色差的,消球差等),数值孔径,和一个分级的刻度,表示孔径光圈的近似调整(大小)。 正如我们上面提到的,与上述0.95数值孔径聚光镜时,一滴油在样品载玻片的底面接触被应用到其上的镜头表现最好。 这保证了从聚光镜发出该斜光线不从滑动下方反射,而是被引导到样品。在实践中,在高分辨率和使用高倍率的物镜准确显微摄影(数值孔径)工作时,这可以成为繁琐,而不是常规镜检常见,但至关重要。
另一个重要的考虑是显微镜载玻片,如盖玻片厚度是其物镜是为关键到聚光镜的厚度。大多数商业生产者提供,与最常见的是非常接近至1.0mm 0.95 1.20毫米的厚度范围的载玻片。厚1.20毫米的显微镜载玻片太厚与最高数值孔径聚光镜倾向于具有非常短的工作距离被使用。虽然这并不大为常规标本观察无所谓,结果可能是灾难性的精密显微摄影。我们建议的显微镜载玻片被选择具有的厚度为1.0±0.05毫米,它们在使用前彻底清洗
当物镜被改变时,例如从10倍到20倍,聚光镜的孔径光阑也必须进行调整,以提供新的物镜的数值孔径相匹配的新的光锥。这是通过打开在图2-6中示出的聚光镜的滚花旋钮完成。有位于该旋钮相比聚光镜壳体上的线性灰度时,指示光圈的相对尺寸小黄色箭头或索引标记。许多制造商将同步此灰度对应于聚光镜的近似数值孔径。例如,如果该显微镜选择了的数值孔径0.25的10X物镜,则箭头将放在下一个上刻聚光镜壳体上的灰度值0.18-0.20(物镜数值孔径为约80%)。
通常情况下,它是不实际的使用单个聚光镜用的物镜(2X至100X)的整个范围,由于广泛的,必须产生以匹配物镜数值孔径光锥。与在2X至5X的范围内的低倍率的物镜,该照明锥体将有6-10毫米之间的直径,而高倍率的物镜(60X到100X)需要高度集中的光锥仅约0.2-0.4毫米直径。具有固定焦距,它是很难达到这个广泛照明锥的与单个聚光镜。
在实践中,这个问题可以通过多种方式来解决。对于低倍率的物镜(下面的10倍),它可能有必要拧下聚光镜的顶部透镜为了填补的视场的光。一些聚光镜产生与倒装顶端上透镜更容易实现这一点,如在图中所示现6.许多厂家生产出具有低倍率的物镜使用时完全翻转过聚光镜。其他公司可能结合辅助矫正镜片的光路与物镜的10倍以上保证适当的照明少。当聚光镜没有它的顶端透镜所使用的,孔径光圈被打开,宽视场光阑,现在在物镜的后可见,作为好像它是孔径光圈。翻盖式聚光镜中的各种与数值孔径范围从0.65至1.35的配置的制造。具有0.95或更小的数值孔径值的那些聚光镜旨在与“干”的物镜用途。但是,具有一个数值孔径大于0.95摇摆式聚光镜旨在用于油浸物镜使用,它们必须有检查临界样品时放置在显微镜载玻片的底部和聚光镜顶部透镜之间的一滴油。
除了上述讨论的共同明聚光镜,有各种各样的适用于许多不同的应用专门的模型。表2列出了一些不同的聚光镜的结构和预期的应用的。
电容式 | 明 | 暗场 | 相 对比 | DIC | 偏振 |
消色差/ 消球差 NA 1.3 | ⋅ [10倍〜100倍] | ||||
消色差摇摆式 NA 0.90 | ⋅ [4倍〜100倍] | ||||
低倍 NA 0.20 | ⋅ [1倍〜10倍] | ||||
相衬阿贝 NA 1.25 | ⋅ | ⋅ [高达0.65 NA] | ⋅ [10倍〜100倍] | ||
相衬消色差 NA 0.85 | ⋅ | ⋅ [高达0.70 NA] | ⋅ [4倍〜100倍] | ||
DIC通用 消色差/ 消球差 | ⋅ | ⋅ [高达0.70 NA] | ⋅ [10倍,100倍] | ⋅ [20倍,40倍,100倍] | |
暗场,干 NA 0.80〜0.95 | ⋅ [4倍〜40倍] | ||||
暗场,油 NA 1.20〜1.43 | ⋅ [4倍〜100倍] | ||||
抗污消色差摇摆式 0.90 NA | ⋅ | ⋅ [4倍〜100倍] |
从表2中的数据,很明显,台下聚光镜具有互换性的不同应用程序之间很大。例如,DIC万向消色差/ 消球差聚光镜为明,暗场和相衬有用,除了主DIC应用。其他聚光镜也有类似的互换性。我们会处理那些需要在我们的部分修改聚光镜个人技术的各个方面专门的显微镜技术。请随时访问我们网站的这个有趣的部分约台下聚光镜更具体的信息。