如果以比奈奎斯特准则或香农定理所要求的速度慢的速度对样本进行采样，则最终数字图像中将无法准确地表示具有高空间频率的细节。在光学显微镜中，光学图像分辨率的阿贝极限为0.22微米，这意味着数字化仪必须能够以与样品空间中0.11微米或更小的间隔进行采样。在每条水平扫描线的512个点对样本进行采样的数字化仪将产生约56微米（512 x 0.11微米）的最大水平视场。如果利用太少的像素来采集样本，那么包含样本的所有空间细节将不会出现在最终图像中。反过来，过度采样。从理论上讲，多余的像素不会对空间分辨率有所贡献，但通常可以帮助提高从数字图像获取的特征测量的准确性。为了确保为高分辨率成像提供足够的采样，建议最小可分辨特征的采样间隔为2.5到3个。
在本程序中，随着“像素尺寸”滑块向右移动，数字图像的空间频率会线性降低。利用的空间频率范围从175 x 175像素（总共30,625个像素）到6 x 6像素（总共36个像素），以在频域内提供广泛的可能分辨率。当滑块向右移动（减少数字图像中的像素数量）时，将以越来越低的空间频率对样本细节进行采样，并且图像细节会丢失。在最低的空间频率下，会发生像素阻塞（通常称为pixelation）并掩盖大多数图像特征。
