应用体视显微镜的绿色荧光蛋白(GFP)的观察是现在这么普遍,体视荧光照明更经常被称为GFP舷窗,即使它们可用于在生命科学和工业两许多其他应用。
本互动程序探讨了配有落射照明中间管和灯箱的尼康SMZ1500体视显微镜的内部光学路径。本程序使用插入到光路中的Endow GFP荧光滤光片组合以及设置为中点的“光束强度”滑块进行初始化,该滑块控制通过显微镜的光的强度。使用“过滤器多维数据集”滑块在三个过滤器组之间切换:
激发块组 | 激发 波长范围 | 双色 镜 | 发射 波长范围 |
---|---|---|---|
蓝色GFP / DAPI | 379-401 nm | 420nm(DCLP) | 435-485nm |
Endow GFP长通 | HQ 450-490 nm | Q 495(LP) | 500nm(LP) |
TRITC(红色) | HQ 530-560 nm | Q 570(LP) | 590-650nm |
大型标本,例如幼虫,线虫,斑马鱼,卵母细胞和成熟昆虫,用GFP标记并用体视显微镜通过荧光技术照射时,可以轻松选择和操作。荧光照明揭示了哪些生物体正在产生荧光蛋白,并且体视视觉与大视野和充足的工作距离相结合,使观察者能够使用镊子,移液器或微型操纵器进行实验。使用具有荧光照明的体视显微镜,还可以轻松观察和记录其他更常规的标本。
体视显微镜上的落射荧光照明器的功能类似于更复杂的复式显微镜所采用的照明器。通常,光源是包含在外部灯箱中的氙灯或汞灯,该灯箱通过位于显微镜变焦镜体与观察管之间的中间管(或垂直照明器)连接到显微镜。目前,这种类型的照明仅限于使用通用主物镜(CMO)体视显微镜的应用,因为无法使用市售部件格里诺或会聚型体视显微镜用于荧光照明。