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徕卡显微镜荧光染料


2016/7/15 9:47:39 发布者:admin


在荧光显微镜的基本原理是用荧光剂的帮助细胞成分的高度特异性的可视化。 这可以是一个荧光蛋白-例如绿色荧光蛋白 -遗传连锁到感兴趣的蛋白质。 如果克隆是不可能的 - 例如组织学样品中的 - 它是需要使用其他技术,如免疫荧光染色来可视化目的蛋白质。 用于此目的的抗体的利用,这是直接或间接地连接到不同的荧光染料和结合到适当的目标结构。 另外,用荧光染料荧光显微镜的帮助下,不仅限于蛋白,但它也使染色核酸,聚糖和其它结构的机会。 像钙离子甚至非生物物质可以被检测出来。 本文介绍了常用的荧光剂。



免疫荧光

在荧光显微镜有两种方式来可视化你感兴趣的蛋白质。无论是与固有荧光信号的帮助 - 通过克隆,因此荧光蛋白基因链接到目标蛋白的手段。或借助荧光标记的特异性结合到感兴趣的蛋白质的抗体。对一些生物学问题是比较有用,甚至必要执行后者。在组织学样品的情况下,例如,它是不可能使用荧光蛋白,因为在一般的样品由不持有任何荧光蛋白质的生物来源。此外,如果一个正常运作的抗体可用,免疫荧光比荧光蛋白技术快很多,是你有兴趣和转染的DNA基因克隆到足够的细胞。荧光蛋白的另一缺点在于它们的存在的蛋白质本身的性质。有了它,他们有一个细胞,其可导致功能障碍或误解关于感兴趣的附着蛋白中的特定蛋白质性特征。然而,应当考虑到使用荧光蛋白通常是选择的方法来观看活细胞。

免疫是利用抗体与其抗原的非常特异性结合亲和力的。这可以有两种不同的外观。最简单的方法是使用一种荧光标记的抗体被结合到感兴趣的蛋白质。这就是所谓的直接免疫荧光 。

在大多数情况下,有使用了两种形式的抗体。第一个结合靶蛋白和未荧光标记的自身(第1抗体)。但是这是结合1 次抗体的第二个(2 次抗体)特异性携带荧光染料。这种方法被称为间接免疫荧光和具有几个优点。一方面有一个放大效应,因为多于一个的2 次抗体结合一种1 次抗体。另一方面,没有必要所有的时间来标记各抗体对你最喜爱的蛋白与荧光染料,但可以利用商业荧光标记的第二抗体。 对于免疫荧光广泛使用的荧光染料是FITC,TRITC或几个的Alexa Fluor®它们在下面提及的染料。


FITC和TRITC

异硫氰酸荧光素(FITC)是有机荧光染料这仍然是在免疫荧光和流式细胞仪使用。它在五百十七分之四百九十五处具有一个激发/发射峰并可以耦合到不同的抗体与它的反应性异硫氰酸酯基,其结合至氨基,巯基,咪唑基,酪氨酰或羰基上的蛋白的帮助。其基本形式- 荧光素 -具有332克/摩尔的摩尔质量和通常用作荧光示踪剂FITC(389克/摩尔)为其用于荧光显微镜的第一染料中的一种,并作为进一步的原点。荧光染料一样的AlexaFluor®488。其荧光活性是由于其大的共轭芳族电子系统,它是由光在蓝色光谱激发。

图1:果蝇胚胎发育,绿色:FITC,红色:TRITC
果蝇胚胎发育,绿色:FITC,红色:TRITC


很多时候同日而语用FITC使用的染料是其发音相似的伙伴TRITC(Tetramethylrhodamine-5-(and 6)-isothiocyanate)。在对比FITC,TRITC不是荧光素,但罗丹明家族的衍生物。罗丹明也有大量的共轭芳族电子系统,是什么导致了他们的荧光行为。相反,FITC,TRITC(479克/摩尔)是兴奋与550纳米的最大绿色光谱的光。 其最大发射躺在在573纳米。 键合到蛋白质(例如抗体)也基于反应性异硫氰酸酯基团。

即使FITC和TRITC仍然在使用,他们推荐的艺术显微镜的状态,而弱荧光染料和不。他们的利润是根据自己的经济代价。


青色素

Cy2,Cy3,Cy5和Cy7:这个相对较小的荧光染料的收藏是从花青这也是因为他们的名字由来的。所有的人都可以通过它们的反应性基团被连接到核酸或蛋白质。对于蛋白质性标记马来酰亚胺基团的使用,例如。 有趣的是 - 关于荧光 - Cy5的是它的电子周边敏感。这可以用于酶测定。附着蛋白引线构象变化,以在荧光发射的正或负改变。此外Cy3和Cy5可用于FRET实验。花青染料是比较老的荧光染料和为具有改进的亮度,耐光性,量子产率等其他荧光染料的基础


Alexa Fluor®染料

Alexa Fluor®染料是其中使用非常经常在荧光显微镜负电荷和亲水性荧光染料的一个大的基团。他们的称谓可以追溯到它的发明者理查德·保罗·格兰谁命名他的儿子亚历克斯毕浩然后的染料。这个标签是分子探针(的子公司的商标寿命技术)。此外,各激光激发波长是在其标签提及。例如非常广泛使用的Alexa Fluor®488具有493纳米,它允许励磁用标准488 nm激光激发最大值。Alexa Fluor®488具有519纳米的最大发射。有了这个特性,Alexa Fluor®488具有非常相似的特性FITC。虽然的Alexa Fluor®488是荧光素衍生物,而相比之下,FITC它具有更好的稳定性,亮度和较低的pH敏感性。所有的Alexa Fluor®染料的荧光素一样,香豆素,花青或罗丹明不同的基本荧光物质(如的Alexa Fluor®546 ,Alexa Fluor®633)磺化形式。它们的摩尔质量范围从410至1400克/摩尔。

图2:转基因小鼠胚胎,体节interlimb,一个E10.5转基因小鼠胚胎的五体节interlimb:EpaxialMyf5绿色荧光蛋白; 免疫染色GFP -Alexa 488;用结蛋白-Cy3的染色胚胎肌纤维,细胞核揭示用Hoechst尺寸从上到下:3.5毫米(a)中,800微米(b)中。 的Aurélie乔里,Cellules Souches等发展署,法国巴斯德研究所,法国巴黎和IGBMC,IGBMC成像中心
转基因小鼠胚胎
图3:小鼠成纤维细胞,绿色:F-肌动蛋白,FITC,红色:微管蛋白,Cy5的,蓝色:细胞核,DAPI。 冈特博士吉斯,马克斯·普朗克医学研究所,德国海德堡
小鼠成纤维细胞


DNA染色

在荧光显微镜不仅蛋白质结构的利益,而且核酸。有时,有必要通过检测其细胞核以限定细胞的确切位置或数量。其中最常见的DNA污斑是DAPI(4',6-二脒基-2-苯基),其结合到在DNA双螺旋的丰富的区域。如果连接到DNA相比,其未绑定状态DAPI荧光强度增加。它通过UV -light与358纳米的最大激发。发射谱很广,在461 nm的峰值。弱荧光也可以为RNA结合检测。在这种情况下,发射转移到500纳米。有趣的是,DAPI能够渗透完整质膜。因此,它可以在固定的,以及在活细胞中使用。

第二个广泛使用的DNA染色方法是赫斯特染料,它最初是由化工公司赫斯特公司生产的家人。赫斯特33258,赫斯特33342和赫斯特34580是双- benzimides与嵌入倾向AT丰富的地区,于是后者不经常使用。以DAPI类似它们是由紫外线 -light并在其移动到510-540纳米未绑定状态455nm的最大发射激发。Hoechst的污渍也细胞渗透性,因此可以在固定和活细胞一起使用。以DAPI的差别就是其较低的毒性。

一种膜防渗DNA染色是碘化碘化。它,它通常被用于在细胞培养物中活的和死的细胞之间进行区分,因为它`吨输入完整的细胞。Propidium-碘也是嵌入剂,但与不同的碱基未结合偏好。在核酸结合状态,它的最大激发是在538纳米。最高发射是在617纳米。未结合的碘化-碘化物激发和发射最大值偏移到较低的波长和强度较低。它也可以结合的RNA,而不改变它的荧光特性。 区分的RNA的DNA,有必要使用适当的核酸酶。

其能够使没有先前操纵DNA和RNA之间的差的染料是吖啶橙。它激发/发射最大对是在DNA结合的版本,502纳米/ 525纳米和转向460纳米/ 650纳米的RNA束缚态。 此外,它能够进入酸性隔室象溶酶体。 有阳离子染料被质子化。 在这种酸性环境吖啶橙是由光的蓝色光谱激发,而发射是橙色区域最强的。 因为细胞凋亡有很多吞没酸性隔室的这使它成为各种细胞的经常使用的标记物。


小室和细胞器特定的染料

图4:Pukinje细胞,小鼠小脑皮质的三重标记矢状窦旁一节。 红色:抗钙结合蛋白D28K / Cy3的绿色:抗GFAP / Cy5的,蓝:赫斯特33258
Pukinje细胞
图5:牛肺的内皮细胞。 红色:线粒体标记MitoTracker®红CMXRos,绿色:DAPI标记细胞核:标有绿色荧光BODIPY®FL phallacidin,蓝F-肌动蛋白。 这张照片是用3D盲解增强
牛肺的内皮细胞


在荧光显微镜它常常是合理的染色细胞区室像溶酶体或内体和细胞器像线粒体。为此,有这将在本节提到可用特定的染料的调色板。

一种公知的方法来观察线粒体是MitoTracker®的利用率。这是一个细胞渗透性染料与轻度硫醇反应性氯基部分。它,它可以共价通过用半胱氨酸残基的游离巯基反应结合基质蛋白。MitoTracker®存在于不同的颜色和修改(第表1)和是分子探针的商标。在对比像若丹明123或tetramethylrosamine,MitoTracker常规线粒体特定污渍®与固定剂的膜电位的破坏后,不洗出。

根据线粒体的污渍也有染料标记的酸性区室像被称为LysoTracker溶酶体。这些是连接到荧光团膜可渗透弱碱。最可能的是这些基地都因为质子化的酸性车厢的亲和力。LysoTrackers,可以在不同的颜色(第表1)。

一个可比车厢溶酶体是像酿酒酵母真菌液泡。这种膜封闭的空间是一种酸性性质也。形象化它在荧光显微镜的一种方法是使用基于苯乙烯基染料像调频4-64®或FM 5-95®的。

当涉及到蛋白质分泌实验内质网(ER)是一种特殊的兴趣。一个经典的染料染色这个车厢是DiOC6(3)。它有急诊室的偏好,但仍然结合到其他膜像线粒体。专门染色质的另一种方法是使用ER-跟踪器一样ER-跟踪绿色和红色。这两者都是链接到格列本脲基BODIPY染料-一个sulfonylurease -结合到ATP敏感性钾通道的完全驻留在ER膜BODIPY(硼二吡咯亚甲基)描述了一组相对不敏感的pH值的染料其中几乎都是不溶于水的。这并不能让他们对蛋白标记,但脂质和膜标签的一个很好的工具。

相邻的隔间内质网-高尔基仪器 -可以用荧光神经酰胺类似物像NBD C6神经酰胺和BODIPY FL C5神经酰胺标记。神经酰胺是它们在高尔基体高度富集鞘脂类。

随着进一步的基于脂质染料的帮助下,可以进行染色样脂质筏特殊的膜的区域。 这些富含胆固醇的域可以通过使用NBD-6胆固醇或NBP-12胆固醇除其他(可视化阿凡提极性脂质 )。

除了使用特殊的非蛋白荧光染料标记的细胞区室,也可以染色的与蛋白质的帮助下与在小区的不同位置偏好感兴趣的区域。 这些蛋白质可以链接到一个荧光染料,并在荧光显微镜观察。 对于这种方法的一个例子是小麦胚芽凝集素(WGA)的特异性结合唾液酸和存在于质膜N-乙酰用法。 WGA耦合至荧光染料。 与它质膜可以观察到。


离子成像

在神经元的研究中,基因的活性或细胞运动的情况下 - 例如 - 它是感兴趣了解的细胞的离子浓度。 钠,钙,氯离子或镁离子具有在许多不同的细胞事件的深刻影响。 通常,离子可被捕获与荧光标记的螯合剂,当结合到合适的离子改变它们的光谱特性的帮助。 这一原则在钙指标FURA-2,印度1,荧光- 3荧光- 4 和钙绿 ,例如实现。

用于检测钠,SBFI(sodium-binding benzofuran isophthalate)或绿色钠常用。PBFI(potassium-binding benzofurzanisophthalate)检测钾离子。

有趣的是也有基于蛋白质的钙指标。 其中之一是基于所述水母化学发光蛋白水母发光蛋白。水母发光蛋白的发光团腔肠素,分子氧和钙离子的相互作用导致蓝色光的释放-在一个非常突出的机构的荧光蛋白质的发现。


荧光染料和它们的激发和发射波长峰

上面提到的所有染料都列出在下表中。 另外附加的荧光染料与它们激发和发射波长峰一起提及。


表 1
荧光染料激发发射
Indo-1, Ca saturated331 nm404 nm
Indo-1 Ca2+346 nm404 nm
Cascade Blue BSA pH 7.0401 nm419 nm
Cascade Blue398 nm420 nm
LysoTracker Blue373 nm421 nm
Alexa 405401 nm421 nm
LysoSensor Blue pH 5.0374 nm424 nm
LysoSensor Blue374 nm424 nm
DyLight 405399 nm434 nm
DyLight 350332 nm435 nm
BFP (Blue Fluorescent Protein)380 nm439 nm
Alexa 350343 nm441 nm
7-Amino-4-methylcoumarin pH 7.0346 nm442 nm
Amino Coumarin345 nm442 nm
AMCA conjugate347 nm444 nm
Coumarin360 nm447 nm
7-Hydroxy-4-methylcoumarin360 nm447 nm
7-Hydroxy-4-methylcoumarin pH 9.0361 nm448 nm
6,8-Difluoro-7-hydroxy-4-methylcoumarin pH 9.0358 nm450 nm
Hoechst 33342352 nm455 nm
Pacific Blue404 nm455 nm
Hoechst 33258352 nm455 nm
Hoechst 33258-DNA352 nm455 nm
Pacific Blue antibody conjugate pH 8.0404 nm455 nm
PO-PRO-1434 nm457 nm
PO-PRO-1-DNA435 nm457 nm
POPO-1433 nm457 nm
POPO-1-DNA433 nm458 nm
DAPI-DNA359 nm461 nm
DAPI358 nm463 nm
Marina Blue362 nm464 nm
SYTOX Blue-DNA445 nm470 nm
CFP (Cyan Fluorescent Protein)434 nm474 nm
eCFP (Enhanced Cyan Fluorescent Protein)437 nm476 nm
1-Anilinonaphthalene-8-sulfonic acid (1,8-ANS)375 nm479 nm
Indo-1, Ca free346 nm479 nm
1,8-ANS (1-Anilinonaphthalene-8-sulfonic acid)375 nm480 nm
BO-PRO-1-DNA462 nm482 nm
BOPRO-1462 nm482 nm
BOBO-1-DNA461 nm484 nm
SYTO 45-DNA451 nm486 nm
evoglow-Pp1448 nm495 nm
evoglow-Bs1448 nm496 nm
evoglow-Bs2448 nm496 nm
Auramine O431 nm501 nm
DiO487 nm501 nm
LysoSensor Green pH 5.0447 nm502 nm
Cy 2489 nm503 nm
LysoSensor Green447 nm504 nm
Fura-2, high Ca336 nm504 nm
Fura-2 Ca2+sup>336 nm505 nm
SYTO 13-DNA488 nm506 nm
YO-PRO-1-DNA491 nm507 nm
YOYO-1-DNA491 nm509 nm
eGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein)488 nm509 nm
LysoTracker Green503 nm509 nm
GFP (S65T)489 nm509 nm
BODIPY FL, MeOH502 nm511 nm
Sapphire396 nm511 nm
BODIPY FL conjugate503 nm512 nm
MitoTracker Green490 nm512 nm
MitoTracker Green FM, MeOH490 nm512 nm
Fluorescein 0.1 M NaOH493 nm513 nm
Calcein pH 9.0494 nm514 nm
Fluorescein pH 9.0490 nm514 nm
Calcein493 nm514 nm
Fura-2, no Ca367 nm515 nm
Fluo-4494 nm516 nm
FDA495 nm517 nm
DTAF495 nm517 nm
Fluorescein495 nm517 nm
Fluorescein antibody conjugate pH 8.0493 nm517 nm
CFDA495 nm517 nm
FITC495 nm517 nm
Alexa Fluor 488 hydrazide-water493 nm518 nm
DyLight 488493 nm518 nm
5-FAM pH 9.0492 nm518 nm
FITC antibody conjugate pH 8.0495 nm519 nm
Alexa 488493 nm520 nm
Rhodamine 110497 nm520 nm
Rhodamine 110 pH 7.0497 nm520 nm
Acridine Orange431 nm520 nm
Alexa Fluor 488 antibody conjugate pH 8.0499 nm520 nm
BCECF pH 5.5485 nm521 nm
PicoGreendsDNA quantitation reagent502 nm522 nm
SYBR Green I498 nm522 nm
Rhodaminen Green pH 7.0497 nm523 nm
CyQUANT GR-DNA502 nm523 nm
NeuroTrace 500/525, green fluorescent Nissl stain-RNA497 nm524 nm
DansylCadaverine335 nm524 nm
Rhodol Green antibody conjugate pH 8.0499 nm524 nm
Fluoro-Emerald495 nm524 nm
Nissl497 nm524 nm
Fluorescein dextran pH 8.0501 nm524 nm
Rhodamine Green497 nm524 nm
5-(and-6)-Carboxy-2', 7'-dichlorofluorescein pH 9.0504 nm525 nm
DansylCadaverine, MeOH335 nm526 nm
eYFP (Enhanced Yellow Fluorescent Protein)514 nm526 nm
Oregon Green 488498 nm526 nm
Oregon Green 488 antibody conjugate pH 8.0498 nm526 nm
Fluo-3506 nm527 nm
BCECF pH 9.0501 nm527 nm
SBFI-Na+336 nm527 nm
Fluo-3 Ca2+506 nm527 nm
Rhodamine 123, MeOH507 nm529 nm
FlAsH509 nm529 nm
Calcium Green-1 Ca2+506 nm529 nm
Magnesium Green507 nm530 nm
DM-NERF pH 4.0493 nm530 nm
Calcium Green506 nm530 nm
Citrine515 nm530 nm
LysoSensor Yellow pH 9.0335 nm530 nm
TO-PRO-1-DNA515 nm531 nm
Magnesium Green Mg2+507 nm531 nm
Sodium Green Na+507 nm531 nm
TOTO-1-DNA514 nm531 nm
Oregon Green 514512 nm532 nm
Oregon Green 514 antibody conjugate pH 8.0513 nm533 nm
NBD-X466 nm534 nm
DM-NERF pH 7.0509 nm537 nm
NBD-X, MeOH467 nm538 nm
CI-NERF pH 6.0513 nm538 nm
Alexa 430431 nm540 nm
Alexa Fluor 430 antibody conjugate pH 7.2431 nm540 nm
CI-NERF pH 2.5504 nm541 nm
Lucifer Yellow, CH428 nm542 nm
LysoSensor Yellow pH 3.0389 nm542 nm
6-TET, SE pH 9.0521 nm542 nm
Eosin antibody conjugate pH 8.0525 nm546 nm
Eosin524 nm546 nm
6-Carboxyrhodamine 6G pH 7.0526 nm547 nm
6-Carboxyrhodamine 6G, hydrochloride525 nm547 nm
Bodipy R6G SE528 nm547 nm
BODIPY R6G, MeOH528 nm547 nm
6 JOE520 nm548 nm
Cascade Yellow antibody conjugate pH 8.0399 nm549 nm
Cascade Yellow399 nm549 nm
mBanana540 nm553 nm
Alexa Fluor 532 antibody conjugate pH 7.2528 nm553 nm
Alexa 532528 nm553 nm
Erythrosin-5-isothiocyanate pH 9.0533 nm554 nm
6-HEX, SE pH 9.0534 nm559 nm
mOrange548 nm562 nm
mHoneydew478 nm562 nm
Cy 3549 nm562 nm
Rhodamine B543 nm565 nm
DiI551 nm565 nm
5-TAMRA-MeOH543 nm567 nm
Alexa 555553 nm568 nm
Alexa Fluor 555 antibody conjugate pH 7.2553 nm568 nm
DyLight 549555 nm569 nm
BODIPY TMR-X, SE544 nm570 nm
BODIPY TMR-X, MeOH544 nm570 nm
PO-PRO-3-DNA539 nm571 nm
PO-PRO-3539 nm571 nm
Rhodamine551 nm573 nm
Bodipy TMR-X conjugate544 nm573 nm
POPO-3533 nm573 nm
Alexa 546562 nm573 nm
BODIPY TMR-X antibody conjugate pH 7.2544 nm573 nm
Calcium Orange Ca2+549 nm573 nm
TRITC550 nm573 nm
Calcium Orange549 nm574 nm
Rhodaminephalloidin pH 7.0558 nm575 nm
MitoTracker Orange551 nm575 nm
MitoTracker Orange, MeOH551 nm575 nm
Phycoerythrin565 nm575 nm
Magnesium Orange550 nm575 nm
R-Phycoerythrin pH 7.5565 nm576 nm
5-TAMRA pH 7.0553 nm576 nm
5-TAMRA549 nm577 nm
Rhod-2552 nm577 nm
FM 1-43472 nm578 nm
Rhod-2 Ca2+553 nm578 nm
Tetramethylrhodamine antibody conjugate pH 8.0552 nm578 nm
FM 1-43 lipid473 nm579 nm
LOLO-1-DNA568 nm580 nm
dTomato554 nm581 nm
DsRed563 nm581 nm
Dapoxyl (2-aminoethyl) sulfonamide372 nm582 nm
Tetramethylrhodamine dextran pH 7.0555 nm582 nm
Fluor-Ruby554 nm582 nm
Resorufin571 nm584 nm
Resorufin pH 9.0571 nm584 nm
mTangerine568 nm585 nm
LysoTracker Red578 nm589 nm
Lissaminerhodamine572 nm590 nm
Cy 3.5578 nm591 nm
Rhodamine Red-X antibody conjugate pH 8.0573 nm591 nm
Sulforhodamine 101, EtOH578 nm593 nm
JC-1 pH 8.2593 nm595 nm
JC-1592 nm595 nm
mStrawberry575 nm596 nm
MitoTracker Red578 nm599 nm
MitoTracker Red, MeOH578 nm599 nm
X-Rhod-1 Ca2+580 nm602 nm
Alexa Fluor 568 antibody conjugate pH 7.2579 nm603 nm
Alexa 568576 nm603 nm
5-ROX pH 7.0578 nm604 nm
5-ROX (5-Carboxy-X-rhodamine, triethylammonium salt)578 nm604 nm
BO-PRO-3-DNA574 nm604 nm
BOPRO-3574 nm604 nm
BOBO-3-DNA570 nm605 nm
Ethidium Bromide524 nm605 nm
ReAsH597 nm608 nm
Calcium Crimson589 nm608 nm
Calcium Crimson Ca2+590 nm608 nm
mRFP585 nm608 nm
mCherry587 nm610 nm
Texas Red-X antibody conjugate pH 7.2596 nm613 nm
HcRed590 nm614 nm
DyLight 594592 nm616 nm
Ethidium homodimer-1-DNA528 nm617 nm
Ethidiumhomodimer528 nm617 nm
Propidium Iodide538 nm617 nm
SYPRO Ruby467 nm618 nm
Propidium Iodide-DNA538 nm619 nm
Alexa 594590 nm619 nm
BODIPY TR-X, SE588 nm621 nm
BODIPY TR-X, MeOH588 nm621 nm
BODIPY TR-X phallacidin pH 7.0590 nm621 nm
Alexa Fluor 610 R-phycoerythrin streptavidin pH 7.2567 nm627 nm
YO-PRO-3-DNA613 nm629 nm
Di-8 ANEPPS469 nm630 nm
Di-8-ANEPPS-lipid469 nm631 nm
YOYO-3-DNA612 nm631 nm
Nile Red-lipid553 nm636 nm
Nile Red559 nm637 nm
DyLight 633624 nm646 nm
mPlum587 nm649 nm
TO-PRO-3-DNA642 nm657 nm
DDAO pH 9.0648 nm657 nm
Fura Red, high Ca434 nm659 nm
Allophycocyanin pH 7.5651 nm660 nm
APC (allophycocyanin)650 nm660 nm
Nile Blue, EtOH631 nm660 nm
TOTO-3-DNA642 nm661 nm
Cy 5646 nm664 nm
BODIPY 650/665-X, MeOH646 nm664 nm
Alexa Fluor 647 R-phycoerythrin streptavidin pH 7.2569 nm666 nm
DyLight 649652 nm668 nm
Alexa Fluor 647 antibody conjugate pH 7.2653 nm668 nm
Alexa 647653 nm669 nm
Fura Red Ca2+435 nm670 nm
Atto 647644 nm670 nm
Fura Red, low Ca472 nm673 nm
Carboxynaphthofluorescein pH 10.0600 nm674 nm
Alexa 660664 nm691 nm
Alexa Fluor 660 antibody conjugate pH 7.2663 nm691 nm
Cy 5.5673 nm692 nm
Alexa Fluor 680 antibody conjugate pH 7.2679 nm702 nm
Alexa 680679 nm703 nm
DyLight 680678 nm706 nm
Alexa Fluor 700 antibody conjugate pH 7.2696 nm719 nm
Alexa 700696 nm720 nm
FM 4-64, 2% CHAPS506 nm751 nm
FM 4-64508 nm751 nm
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