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以下部分回顾在低和高放大率透射暗场照明的显微镜的结构和对准的步骤。
低倍率透射显微镜暗视场结构
染色高对比度的合适的样品被选择并且放置在显微镜工作台上观察和显微镜校准。 选择10倍的物镜和标本被带到清晰的对焦及明场照明。
小心地将显微镜的光学元件和调节光源和隔膜进行适当的柯勒照明用我们的科勒照明设置部分概述了一个程序透射光显微镜。
进一步继续之前的任何打开外地和台下聚光镜孔径光阑其全开位置。 这允许在其最大数值孔径来操作聚光镜。 选择适当的中央不透明光圈（通常约16-18毫米直径停一10倍的物镜），并将其放置到蜘蛛，玻璃或醋酸阻挡器。 接着，由任一滑动到子聚光镜过滤器保持器，或者它编带就位在聚光镜的下侧插入止动保持器装配到显微镜的光路中。
如果在低倍率暗场照明而设计的聚光镜是被使用，将其插入台下聚光器安装在该点在显微镜的结构。
卸下目镜和窥视目镜管或通过插入一个相位望远镜（或伯特兰透镜）查看物镜的后侧焦点面。 常的光的明亮的磁盘部分地由中央遮光停止遮挡将在物镜后侧焦点面是可见的。 理想的是，中央止直径应比亮磁盘稍大并完全掩盖它。 如果不是这种情况下，使用台下定心螺钉居中聚光镜，使得亮盘被中央站完全覆盖。
更换目镜和放置一个低对比度试样上是适合于暗场照明的观察阶段。 试样的图像应光亮上非常暗的背景下，只工件上的显微镜载玻片被灰尘和污迹的小颗粒。 如果图像太暗，增加电压对卤钨光源达到其最大电压。
聚焦聚光镜是最后一步，应该得到特别注意，使用上述放大20倍的物镜时尤其如此。 聚光镜的顶部透镜（所用的“干”时）应几乎接触到显微镜载玻片的下侧接触。 当聚光镜是在机架定位太低，通过光的亮环包围的暗中心区域是在视场明显。 这是通过提高聚光镜直到非常小的直径的一个明亮的圆形区域在视场的中心部分完全照亮补救。
显微镜现在准备在低倍暗场照明观察和显微摄影标本。
高倍率透射显微镜暗视场结构
在类似的低功耗暗视野显微镜结构的方式，将载物台上的染色标本，并使用10倍的物镜，对准在显微镜柯勒照明作为我们的一节所述透射光镜。
使用聚光镜架旋钮，降低并去除明场聚光器。 插入该反射光高数值孔径聚光镜插入支架，并与该组螺丝固定。 慢慢提高聚光镜，直到它从试样滑动的下侧小于2毫米。
选择一个暗场标本，并将其放置到物镜和聚光镜之间的显微镜载物台。 聚光镜将投射的光的亮环上可用于定心的光路的示例。 使用聚光镜平移定心螺钉的光的环移动到视场的中心。
它通常是有利定心高数值孔径暗场聚光镜何时使用低倍率10倍的物镜。 当用10倍的物镜观看样本，同时缓慢升高和降低聚光镜，点将到达了一个亮点将出现在视场，如图2（a）所示。 作为聚光镜略微升高或降低，类似于图2所示的黑点（b）的出现，如果聚光镜适当居中。 在聚光镜没有正确对齐并居中的情况下，视场可能看起来像在图2（c）所示，如果在显微镜未正确调整科勒照明，因为它在图确实的视场可能会出现图2（d）。 聚光镜的理想和正确定位在图2（a）中示出，并且直到在视野中出现这种方式聚光镜应调整。
高数值孔径暗场聚光镜设计中使用的聚光镜的顶部透镜和显微镜载玻片的底部之间或“干”或浸油。要将油沉浸聚光镜，除去显微镜载玻片，慢慢地架聚光镜向下跌破机械平台，并放置一滴油直接在镜头前。 更换幻灯片，则直到接触油滴和滑动的底面之间形成慢慢提升聚光镜。 仔细观察油的接触面积，以确定是否有任何气泡已被引入到聚光镜顶部透镜和显微镜载玻片之间的空间。 应当注意的是，不管物镜的倍率是什么，如果没有油用于油浸聚光镜，光不会从聚光镜出来。
气泡会散射光线，并应通过与任一相望远镜或伯特兰透镜除去目镜和观看的物镜的后焦平面观察到。 如果无气泡存在时，继续到下一个步骤。 当检测到的气泡，从滑动和聚光镜顶部透镜既去除油所有痕迹和重复该过程。 请确保两个表面是干净的，完全无油，灰尘，污垢和其他污染的文物重新注油聚光镜前。
选择用于查看标本的物镜和回旋到聚光镜上述立场。 如果物镜被设计为可使用干燥，然后集中在试样并通过调整聚光镜调焦旋钮优化照明。 随着油浸物镜，将油物镜的前镜头上一滴摇摆到位之前。缓慢移动的物镜到位，并仔细观察的物镜镜头前和显微镜载玻片之间的油接触面积。 明亮的闪光应该（散射光）物镜镜头前的瞬间油接触到显微镜滑动接触发生。
通过观察物镜的后焦平面与相望远镜或伯特兰透镜检查气泡。 如果气泡存在，摆在物镜上在显微镜物镜转换器的下一个制动停止，擦去多余的油用一块不起毛的镜头组织。 重新应用油物镜镜头前，然后再试一次。 当油接触面积是免费的气泡，用聚光镜调焦旋钮来优化暗场照明。
如果物镜有一个内部可变光阑设计为允许的数值孔径的调整，但是应当在此时（这仅适用于浸油物镜具有一个数值孔径比1.20以上）调节。 卸下目镜和放置一个相位望远镜到眼睛管或使用勃氏镜观察物镜的后侧焦平面上。 如果光的亮环围绕中央暗区看到，物镜的口径太大，必须使用内部光圈，还是应该选择一个较小的数值孔径的物镜减少。 调整光圈直到光环落在了视场的。 如果观察到的光的月牙形弧，然后在聚光镜没有正确的显微镜光轴的中心对准。 使用聚光镜定心螺钉，使得电弧消失或变得光的一个完整的圆对齐聚光镜。
更换目镜和重点样本，它现在应该出现在一个黑暗的背景明亮，均匀照亮。 当选择另外一个物镜，重复上述步骤对齐优化暗视野显微镜检查聚光镜和物镜的。
认真注意应始终给予显微镜对准，而不论该照射模式是否为明，暗场，相衬或一些其它反差增强技术。 在这方面花费的时间将在显微镜都为常规观测和关键数字成像或摄影的优异性能得到偿还。
