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有关光学显微镜的常见问题解答


2020/11/25 9:20:16 发布者:admin


  • 物镜上的铭文0.17表示什么?

    0.17是指镜片设计者在计算物镜校正值时所假定的防护玻璃厚度(以毫米为单位)。对于数值孔径大于0.45的物镜,此假定厚度的偏差(或根本没有盖玻片)可能会导致图像质量下降。

  • 物镜外筒上刻有NA编号的意义是什么?

    该数字是物镜的数值孔径,是物镜聚光能力的度量。在其他条件相同的情况下,数值孔径越高,物镜在形成图像时能够更好地分离出样本的细节;图像也更亮。更高的NA物镜通常更昂贵。物镜的数值孔径越高,景深越浅(请参阅景深的定义)。

  • 物镜铭文160是什么意思?

    该数字表示有限的机械筒长物镜。从物镜接口的开口(物镜拧入的位置)到观察管顶部(物镜的插入位置)的距离为160毫米。如果延长该距离(例如,通过将附件插入物镜转接头上方的光路中),则将导致球差,除非在附件中包括经过光学校正的镜头。

  • 物镜铭文∞表示什么?

    该铭文将物镜标识为无穷大校正的物镜。从这样的物镜发出的光线成束平行射向无穷远。这样的物镜具有许多优点,需要在光路中的管状透镜会聚平行光线,以使它们聚焦在目镜光阑的平场上。

  • 一些物镜有铭文Plan。那是什么意思?

    Plan表示一个物镜平场度,该物镜在目镜的光阑平场上投射出从视场的边缘到边缘平坦的图像。一些物镜,例如新的平场消色差物镜和新的平整萤石,即使在具有最大26.5视场数的目镜(FN见下文)的情况下,也能提供平坦的图像;FN 22以下的其他产品。

  • 如果物镜上带有铭文Plan apo,那是什么意思?

    术语Plan apo表示Plan apochromat,这是校正程度最高的物镜,已针对四种颜色分别进行了彩色和球形校正。对于这种物镜,其放大率将比较小校正的物镜具有更高的数值孔径。平场消色差是关键分辨率和彩色显微照相的物镜。在其他条件相同的情况下,它们通常具有较浅的景深。它们也更昂贵。

  • 铭文Plan FL是什么意思?

    Plan FL表示物镜,它是一种萤石,也称为平场半复消色差物镜。(有些制造商称这类物镜为Fluars或Neofluars)。这些物镜还针对四个波长进行了校正,但并不完全像平场消色差透镜那样。萤石也非常适合彩色显微照相,并且比平场消色差透镜便宜。

  • 有些物镜没有关于其更正的铭文,或者只有铭文Plan。这些是什么?

    这样的物镜是消色差透镜或平场消色差透镜。现在将它们分别校正为三个波长的色度和一个或两个球形的波长。他们在绿灯下给出良好图像。然而,在白光下,平色层将为彩色显微照相产生令人满意的图像,但不如更好的校正物镜。

  • 物镜通常刻有彩色环。这些颜色代表什么?

    4x或5x有一个红色环;10倍黄色;20倍绿色;40倍或50倍或60倍蓝色;100倍白色。这些环使从视觉上识别物镜的放大倍率更加容易。颜色是大多数制造商的标准配置。此外,通过在物镜(LB系列)的前透镜附近有一个红色环,或在无穷大系列物镜的所有绿色标记中进一步识别奥林巴斯相差物镜。

  • 什么是无盖玻片或NCG或NC物镜?

    设计这种物镜的目的是查看没有被盖玻片覆盖的标本。例如涂片。在大于0.45的数值孔径下,当检查涂片或其他未覆盖的样本时,这样的物镜将产生没有球差的图像。金相物镜几乎总是设计用来观察未发现的物体。例如,抛光金属,硅片等。

  • 为什么要使用标有LWD或ULWD的物镜?

    LWD或ULWD字母表示长工作距离或超长工作距离的物镜。从物镜前透镜到聚焦样品的垂直距离(工作距离)比类似放大倍率物镜的垂直距离长得多。对于通过倒置生物学显微镜中的培养皿或培养皿进行查找,这样的物镜是无价的。或检查IC晶片以防止与晶片的意外接触;或 或检查已安装芯片的焊接连接。

  • 一些物镜被标记为NIC或DIC,为什么?

    这是物镜,优选用于Nomarski(NIC)或微分干涉显微镜(DIC)。

  • 物镜上铭文上的oil或oel或WI是什么意思?

    这样的物镜是一种浸入式物镜,需要在与盖玻片或涂片顶部接触的物镜的前透镜之间滴入一滴浸油(或水)。除非与这样的物镜有油接触,否则图像将非常差。一些制造商在枪管的下部刻有一个黑色的环,以使用户能够立即认识到需要油接触。类似地,字母WI表示需要水而不是油作为浸入接触介质的物镜。为了获得1.0以上的数值孔径,需要浸没物镜。WI物镜在观察活生物标本时特别有用。

  • 为什么有些物镜标记为UV?

    普通玻璃对于波长低于400纳米的紫外线相对不透明。紫外线物镜包含特殊配制的玻璃元素和涂层,以透射相对高百分比的此类波长的光。这些物镜对于反射光荧光工作中的近紫外激发非常有用。新的奥林巴斯无穷大校正后的U-平铬铁矿和U-荧光石在近紫外光下具有这种改善的透射率。

  • 相差物镜上的字母PL或NH是什么意思?

    字母PL代表正的低相差差,在该相差差中,标本显得比视场的背景暗。较不常用的字母NH代表负高,这是一种相差对比,其中标本看上去比背景亮。

  • 为什么某些物镜标为P或POL或SF?

    这些字母表示物镜相对无应变(也就是说,物镜本身对偏振光几乎没有影响)。高质量的偏振光定性和/或定量研究需要这些物镜。

  • 目镜除了标有放大倍率外,还标有20或22或26.5。这些数字是什么意思?

    名称是目镜的视场编号。与特定物镜一起使用的目镜的视场数越高,在视场中出现的标本面积就越多。通过将目镜的视场数除以物镜的放大倍数,可以计算出以毫米为单位的视场直径。(例如,使用10倍物镜和22倍目镜,则视场直径为2.2毫米)对于许多显微学家(例如血液学家)而言,节省了时间,可以在以下位置看到更多的标本在给定的时间。视场数为26.5的目镜称为超宽目镜。

  • 目镜上的铭文C或K或WF或H是什么意思?

    C或k表示补偿目镜。一些显微镜物镜不包括横向色差校正。对于此类物镜(奥林巴斯LB系列),补偿目镜可完成校正。WF表示宽视野;在给定的时间可以看到更多的标本。H表示高视点,这意味着在观察期间用户的眼睛不必非常靠近目镜的顶部镜片。对眼镜配戴者而言特别有益。

  • 为什么某些观察管上有切口。

    该凹口用于将突出的“定位器”销钉放置在已安装标线片的目镜上。这种目镜可以通过旋转其屈光度可调节的上镜片来聚焦,而“定位器”销则可将标线片(例如十字准线或千分尺)正确定向。

  • 最常见的观察筒的外部尺寸是多少?

    它们通常为25毫米或30毫米(如最新的Olympus B-max显微镜和所有Olympus超宽观察管)。

  • 什么是光电目镜?

    这是用于显微照相的目镜,不用于观察。目镜“拾取”由物镜投影的图像,然后将该图像投影到相机内部的胶片平场上。光电目镜(也称为投影镜头)通常具有较低的放大倍率,因为它们随后投影到胶片上的图像通常会进一步放大(以减少“空”放大率的机会)。

  • 某些物镜(放大倍数为20x或更高)具有弹簧加载或可伸缩的前透镜组件。为什么?

    这样的物镜的自由工作距离很短;因此有无意中将物镜的前部撞到玻璃盖或样品上的危险。弹簧加载的前透镜组件使该部件在与样品轻轻接触时缩回。它不能防止粗暴,持续的压力接触。

  • 某些物镜带有内置的视场光阑。该光阑的用途是什么?

    在暗视野显微镜检查过程中,将光阑部分关闭,以将物镜的数值孔径减小到暗场聚光镜上刻划的两个数值孔径中较低者以下。此操作可在暗场观察中保留背景的暗度。当使用油浸式暗场聚光镜时,视场光阑片对于高数值孔径油浸物镜(NA 1.2以上)绝对必要。对于普通的明场观察,该虹膜光圈保持打开状态。

  • 在某些“干燥”的20x,40x或60x物镜上发现校正环的目的是什么?

    旋转时,校正轴环将物镜的某些内部玻璃元件分离或聚集在一起。此操作可以纠正不正确的保护玻璃厚度。在立式显微镜中,轴环的校正范围通常为0.11-0.22毫米。对于倒置显微镜,校正能力的范围是从0(未覆盖)到2毫米,以校正较厚的培养皿。目的是消除球差。

  • 物镜的自由工作距离是什么意思?

    当样品聚焦时,这是从物镜前端到玻璃盖或未覆盖样品的垂直距离,以毫米为单位,或者是毫米的十进制小数。高倍物镜通常具有非常短的工作距离。制造商应该能够为您提供每个物镜的工作距离数据。

  • 显微镜的调节距离或共焦距离是什么意思?

    在大多数现代显微镜中,此距离(45毫米)是从物镜转盘开口到聚焦标本的选定距离。通过为所有物镜设置标准距离,可以轻松地将每个物镜依次旋转到光路中,而无需重新聚焦。尽管物镜本身的长度各不相同,但这种物镜被描述为是共焦的。此外,如果在更改物镜时仍以视场为中心的聚焦功能保持居中,则将这些物镜称为同心圆。

  • 物镜的分辨力是什么意思,与分辨力有什么区别?

    物镜的分辨能力是指该物镜产生图像的能力,该图像可以清楚地分离出试样中靠近的点或线。(点或线之间的)距离越短,物镜的分辨力越好。分辨能力与物镜的数值孔径有关。数值孔径越大,分辨力越好。公式表示为:


  • d = / 2N.A.

  • 或 d = 0.61 / NA


  • 前者根据阿贝(Abbe),后者根据瑞利(Rayleigh)。在公式中,d是两个紧靠的点之间的距离;λ是所用光的波长;NA是数值孔径。分辨率是显微镜系统实现的实际分离。例如,在科勒照明中,通常会稍微关闭聚光镜,以实现分辨力和对比度之间的折衷,从而提高可见度。

  • “dry”物镜(在其前透镜和样品之间需要空气)的最大数值孔径是多少?

    “dry”物镜的最高NA为0.95。如果要使这种物镜透过玻璃罩,则必须具有校正环。如果将这种物镜设计用于未覆盖的物体(例如污迹或金相物),则将不需要校正环。

  • 数值孔径和图像亮度之间的关系是什么?在图像的放大率和亮度之间?

    在其他条件相同的情况下,图像的亮度直接随NA的平方而变化;作为反射光荧光的第四次方。因此,较高的NA产生较亮的图像。相反,亮度与放大倍数的平方成反比。因此,在其他条件相同的情况下,更高的放大倍率会降低图像的亮度。

  • 我可以在有限管长的显微镜上使用无限远校正物镜吗?

    不可以,因为有限系统不包括将平行光线聚焦的管状透镜。

  • 我可以在无穷大校正系统上使用有限管长物镜吗?

    尽管您可以将物镜旋入物镜转镜,但光路上存在套筒镜会导致图像质量下降。

  • 我可以在Olympus无限远校正系统上使用其他显微镜制造商的无限远校正物镜吗?

    不,那是不明智的。奥林巴斯筒镜的焦距(180mm)与其他制造商的焦距不同。结果,物镜的放大率将不准确。另外,将引入像差,因为其他公司会校正镜筒透镜中的横向色差;B-Max系列的新奥林巴斯物镜实现了物镜本身的这一校正。而且,该物镜可能不会与奥林巴斯的物镜齐心。

  • 新系列的Olympus无限远校正金相物镜能否在生物B-Max显微镜上使用?

    是。对于有盖或无盖的样品,NA 0.40以下的金相物镜应能提供令人满意的图像。对于NA高于0.40的样品,不应用盖玻片覆盖,因为已针对未覆盖的样品校正了金相物镜。工作距离可能很短,并且与生物物镜的共焦可能不那么精确。

  • 平场消色差物镜可以用于反射光荧光吗?

    答案是暂时的。平场消色差可以令人满意地用于蓝色或绿色激发波的长度。但是,平色玻璃的玻璃元素本身可能会在近紫外光的激发下发出荧光。同样,平色散物在其各自的放大倍数下比平荧石或平色散物镜具有较低的NA,因此图像可能不那么明亮。

  • 相差物镜可以用于常规明场观察吗?

    是。相差聚光镜应移至O位置,并应采用标准的Köhler照明结构。该明场图像几乎与使用常规明场物镜一样好。

  • 临床实验室显微镜通常选择什么物镜?

    这样的显微镜可以用普通消色差透镜或平场消色差透镜令人满意地起作用。为了进行研究,或为了获得最佳的彩色显微照相,优选萤石或平场消色差透镜(且价格更高)。

  • 使用40倍物镜时,图像看起来可能比20倍物镜时差。为什么?

    样品可以用比标准的0.17毫米厚的盖玻片覆盖,也可以安装在盖玻片下方的厚安装介质中。解决的办法可能是使用带有校正环的“干”物镜。或用40倍或50倍油浸物镜代替40倍“干”透镜,因为该物镜对盖板玻璃厚度的变化不太敏感。

  • 以给定的放大倍数为物镜,为什么不应该使用越来越高的放大倍率目镜来获得更高的总放大倍率呢?

    为了保持有用的放大倍率,即放大倍率可以得到令人满意的清晰度和分辨率,必须避免使样品看起来更大但更不清晰(“空”放大倍率)。显微镜的一般经验法则是,总放大倍率不应超过数值孔径的750倍至1000倍。例如,对于40x NA 0.65物镜,总放大倍率(目镜和物镜放大倍数的倍数)应在480x到650x之间。

  • 景深是什么意思?

    这是样品中的垂直距离,通常从精确的焦平场的上方和下方测量,通常为微米,仍会生成可接受的图像。NA越高,该距离越浅。

  • 焦点深度是多少?

    这是图像空间中(在胶片平场上)从精确图像平场的上方和下方开始的垂直距离,该距离看起来令人满意。与预期相反,低倍物镜的焦点深度较浅。这使得在显微照相中以低功率物镜获得清晰的图像更加困难。

  • 放置在光路上的绿色滤光片的价值是多少?

    因为消色差透镜和平场消色差透镜最好对绿光进行球形校正,并且由于使用单色光消除了色差,所以使用绿色滤光片可显着改善消色差透镜的性能。同样,计算相差对比物镜以在绿光下给出最佳相差图像。

  • 一些显微镜配备了所谓的日光蓝色滤镜。这是做什么用的(或误用了)?

    “日光蓝色”滤光片仅用于观察。它为视野提供了宜人的浅蓝灰色背景。它不适用于带有日光彩色胶片的显微照相。这种胶片需要使用蓝色转换滤镜,例如Olympus LBD或Kodak 80A滤镜。转换滤镜可提高光源的色温,从而模拟日光平衡色膜所需的日光色温质量(5500开尔文)的光。

  • 载物台聚光镜如何帮助提供出色的图像?

    显微镜的工作数值孔径是物镜的NA加上聚光镜的NA除以2的总和。为了保持更好的对比度和良好的分辨率,聚光镜的光圈(孔径光阑)通常打开到大约3物镜NA的/ 4。聚光镜的颜色和球面校正也各不相同-从阿贝聚光镜的相对适度的校正到最高校正的平场消色差-消色差聚光镜。具有较高NA的平场消色差消色差聚光镜是彩色显微照相的最佳选择。一些冷凝器有一个上摆式元件。将该元件置于光路之外,聚光镜就可以在不渐晕的情况下填充4倍或2倍物镜的视场。

  • 一些物镜接口具有较宽的直径开口,可将物镜拧入其中。为什么?

    在金相显微镜中,物镜可用于反射光明场和/或暗场观察。这些物镜有一个直径较大的镜筒,可用于暗场反射光。因此需要更宽的物镜转盘开口。此类物镜可以标记为Neo或B / D或BF / DF。

  • 您如何才能将浸没油浸入40倍“干”物镜的可能性降至最低?

    临床实验室中经常使用的一种权宜之计是将“干燥” 40x安装在与100x油浸物镜相对的物镜转接头的相反侧。当您在100x油镜和40x干镜之间旋转物镜转接头时,这种安装方式可减少40x“干镜”物镜无意中浸入浸油的可能性。

  • 对于40倍“干式”物镜,是否有一个很好的替代选择来避免所述的上油“危害”?

    如果经常使用100倍油镜,建议用50倍OIL浸入式物镜代替40倍“干”物镜。与标准的40x(NA 0.65)干平场消色差或消色差镜头相比,50倍(NA 0.90)油平场消色差将产生更明亮的图像,并且具有更好的分辨率。

  • 根据建议选择50倍油镜是否有缺点?

    50倍的平色油的价格大约是40倍的“干”平色度的两倍。而且,由于血油可能会粘附并无意中升起盖玻片,因此很难在血细胞计数器上使用油镜。

  • 通常建议购买预算允许的“最佳”(最高校正)物镜吗?

    是的,但有一些警告:如果您通常要观察厚度大于数微米的标本,则平色散或平萤石可能会很好地发挥作用,因为它们的景深要比同等放大倍数的平场消色差。对于彩色显微照相术,与萤光消色差相比,平萤石能够呈现更好的彩色图像。对于微小的细节最好的彩色显微照相(和观察),平场消色差是最佳选择,但价格比平萤石高出几倍。

  • 为微小样品细节的视频显微镜选择最高可用的NA物镜是否重要?

    是。尽管在聚光镜光圈为100%打开的情况下通过目镜观察到的图像可能会有太多眩光,使得细节变得不可见,但“信息”可能存在。控制亮度和对比度的视频增强技术可以处理此“信息”,并渲染细节的出色,高分辨率,可见视频图像。

  • 新的奥林巴斯无穷大校正的金相物镜与新的无穷大校正的生物物镜齐焦距离相同吗?

    对,他们是。

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