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图像中两点之间观察到的对比度随着两点之间的距离变小而减小。这种关系可以用图像调制度与样本显示的重复周期大小的关系来定量表示。
本互动教程探讨了显微镜物镜和聚光镜数值孔径大小对作为样品空间频率的函数的相对调制的影响。要操作该教程，请使用鼠标光标选择“物镜”或“聚光镜”单选按钮以激活该组控件。选择“物镜”单选按钮时，可以使用“数值孔径”滑块（范围在0.25和1.34之间）显示物镜数值孔径的变化如何影响相对调制。备选地，当聚光镜单选按钮被选择时，滑块回复到显示所述聚光镜的数值孔径和的值两者的双重功能中号由等式得出：
NA（Cond）= NA（Obj）×M
其中NA（Cond）是最大值（1.32）时的聚光镜数值孔径，而NA（Obj）是物镜数值孔径。当滑块从左向右移动时，M的值从1.0减小到0，从而在教程窗口的图形上产生相对调制的相应变化。
输出信号的调制，即形成样本图像的光波强度，对应于显微镜中图像对比度的形成。因此，可以从由样品中存在的周期线或间隔产生的对比度获得特定光学显微镜对MTF的测量值，该周期线或间隔是由于图像中正弦强度随空间频率而变化而产生的。如果使用浸没油以匹配的物镜/聚光镜对在高数值孔径（本教程中为1.32）以高数值孔径（本教程中为1.32）对空间周期为1微米（交替的吸收线和透明线对之间的距离）的样品进行成像，则各个线对将为在显微镜下清晰可见。该图像不会忠实复制样本图案，但在间距较近的要素之间会具有中等程度的对比度。将线对之间的距离减小到0.5微米的空间周期（空间频率等于每毫米2000条线）将进一步降低最终图像的对比度，但将空间周期增大到2微米（空间频率等于每毫米500条线） ）会产生相应的图像对比度增加。
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